※ 模板DNA经高温变性，使之成为单链，以便与引物结合，为下轮反应作准备；

※ 经高温变性的模板DNA单链低温退火，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

※ 适温延伸：DNA模板-引物结合物在聚合酶作用下，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新DNA链。

※ 每完成一个循环需2~4分钟，2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

PCR反应要素

DNA模版：可以是双链、单链、提取染色体的DNA、克隆的质粒DNA；

引物：一对寡聚DNA，分别与模板两侧的3’端序列互补，可使DNA序列得到扩增；

DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）：催化DNA合成；

缓冲液：提供DNA合成反应所需的PH,离子强度等环境；

4种单核苷酸：dNTP,提供DNA合成原料。

实验材料

PCR扩增仪、PCR反应管、PCR离心管、移液器、凝胶电泳设备、冰盒、离心机模板、PCR引物、TaqDNA聚合酶、dNTP反应缓冲液、Mg2+、ddH2O。

PCR反应体系

以DNA为模板的反应体系：

模板：DNA102~105拷贝

引物

底物：4种dNTP

TaqDNA聚合酶

缓冲液

以mRNA为模板的反应（逆转录PCR）

模板：RNA

引物：oligo(dT)12~18

底物：4种dNTP

逆转录酶

缓冲液

其他试剂：RNA酶抑制剂，MgCl2.DTT.